
磷含(han)量分析(xi)
土壤磷的(de)檢測使(shi)用(yong)Zr-Oxide DGT裝(zhuang)置。Zr-Oxide DGT經(jing)過(guo)土(tu)壤(rang)樣品(pin)暴露後,按(an)照以下流(liu)程測定(ding)磷。
溶液(ye)提(ti)取(qu)法(fa)
1) 回(hui)收(shou)固定(ding)膜:從裝(zhuang)置中取(qu)出(chu)Zr-Oxide固定(ding)膜圓片(pian),用少(shao)量去離(li)子水(shui)沖(chong)洗(xi)膜表面(mian)。
2) 提(ti)取(qu):將固定(ding)膜放入20mL的離(li)心(xin)管(guan)中,加入10mL 1 mol L-1 NaOH,室溫下(xia)靜(jing)置 提(ti)取(qu)24h取(qu)出(chu)固定(ding)膜,保(bao)存(cun)提(ti)取(qu)液(ye)待(dai)測定(ding)。
3) 磷測定(ding):采用磷鉬(mu)藍顯(xian)色(se)法(fa),紫(zi)外分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)測定(ding);微量樣品(pin)采用96微孔板分(fen) 光光(guang)度(du)計(ji)法(fa),可在1分(fen)鐘內(nei)壹(yi)次(ci)性分析(xi)96個樣品(pin)。
微孔板分(fen)光光(guang)度(du)法(fa):
顯色劑(ji)配置:量取(qu) 194.6mL 的濃(nong)硫(liu)酸(suan),緩(huan)慢(man)加到(dao) 500mL 的去離(li)子中,待(dai)冷卻(que),然後 稱(cheng)取(qu) 20g 鉬酸(suan)銨(an)[(NH4)6Mo7O24·4H2O]和(he) 0.5g 酒(jiu)石酸(suan)銻鉀[K(SbO)C4H4O6·1/2H2O] 分別 於 100mL 水(shui)中溶解,兩(liang)者(zhe)緩慢(man)加入到(dao)上(shang)述(shu)稀(xi)釋(shi)冷(leng)卻後的濃(nong)硫(liu)酸(suan)中,定(ding)容(rong)至(zhi) 1000mL。 該(gai)溶液(ye)作(zuo)為(wei)儲備液(ye)貯(zhu)存於棕(zong)色(se)試(shi)劑瓶(ping)中,在冷(leng)處(chu)可保(bao)存(cun)數(shu)月(yue)。磷微量比色分析(xi)前(qian),稱(cheng) 取(qu) 1.5g 抗(kang)壞血(xue)酸(suan)溶(rong)於 100mL 儲備液(ye)中。用於制(zhi)備溶液(ye)的(de)所(suo)有試(shi)劑均(jun)為(wei)分(fen)析(xi)級。 測定(ding)流(liu)程:吸取(qu)適量 NaOH 提取(qu)液(ye)至(zhi) 96 孔酶標(biao)板(ban)微孔中,確定(ding)合適的(de)稀(xi)釋(shi)倍(bei)數,按(an) 樣品(pin)與 2M H2SO4 比例(li) 4:1(體積比)加入 2M H2SO4進行(xing)酸(suan)堿(jian)中和(he),總(zong)體積為 200 μL。 加入過(guo)程中若(ruo)產生氣(qi)泡,需進行(xing)離(li)心(xin)消(xiao)除(chu)。隨(sui)後,按(an)樣品(pin)與顯(xian)色劑(ji) 10:1(體積比)加 入顯色劑 20 μL,加樣的(de)酶標(biao)板(ban)置於 35℃微型(xing)振蕩器中恒(heng)溫振(zhen)蕩顯色 45min,然後通(tong) 過(guo)微孔板分(fen)光光(guang)度(du)計(ji)在(zai) 700nm 波長下(xia)讀取(qu)每(mei)個微孔的吸光(guang)值(zhi),扣(kou)除(chu)該(gai)微孔的空(kong)白(bai)吸光(guang) 值後,得到(dao)每(mei)個微孔中提取(qu)液(ye)的(de)吸光(guang)度(du),根(gen)據(ju)標(biao)線換(huan)算(suan)成(cheng)提(ti)取(qu)液(ye)濃(nong)度。
