在(zai)湖泊(bo)水(shui)環境(jing)中，磷的(de)分(fen)布和(he)賦(fu)存(cun)形(xing)態(tai)會直(zhi)接(jie)或(huo)間接(jie)地(di)影響(xiang)到(dao)水(shui)體(ti)初(chu)級生產力(li)及浮(fu)遊(you)生物(wu)的(de)分(fen)布情(qing)況。湖泊(bo)通常被(bei)認為(wei)是汙(wu)染源的“匯(hui)"，外(wai)源磷進(jin)入(ru)湖泊後會轉(zhuan)變(bian)成不(bu)同形(xing)態(tai)。研(yan)究表明(ming)，不(bu)同形(xing)態(tai)的(de)磷生(sheng)物(wu)活(huo)性(xing)及其在(zai)水(shui)環境(jing)遷(qian)移轉(zhuan)化和(he)循環路(lu)徑不(bu)同，僅(jin)僅(jin)依(yi)靠TP含量來判(pan)斷(duan)富營養化情(qing)況的傳(chuan)統(tong)方(fang)法已(yi)不(bu)能(neng)揭示水(shui)華(hua)暴發的過程(cheng)與(yu)機(ji)制。因此(ci)，研(yan)究磷賦(fu)存(cun)形(xing)態(tai)，發展分(fen)級提取(qu)的(de)方(fang)法有利(li)於(yu)研(yan)究磷素(su)行(xing)為(wei)，針對性(xing)解決(jue)水(shui)體(ti)富(fu)營養化問題(ti)，尤其對沈積物中磷內(nei)源釋(shi)放(fang)的(de)研(yan)究和(he)治(zhi)理具(ju)有重要(yao)意義(yi)。
實(shi)驗方(fang)法
紫外(wai)-可(ke)見(jian)分(fen)光光度法(fa)：紫外(wai)-可(ke)見(jian)分(fen)光光度法(fa)是(shi)在(zai)190～800nm波長範(fan)圍(wei)內(nei)測定物質的吸(xi)光度，用於鑒(jian)別、雜(za)質(zhi)檢查和(he)定量測定的方(fang)法。當(dang)光穿(chuan)過(guo)被測物(wu)質(zhi)溶(rong)液時(shi)，物質(zhi)對光的吸(xi)收程(cheng)度隨(sui)光的波長不(bu)同而(er)變(bian)化(hua)。
鉬銻抗比(bi)色法(fa)：在(zai)壹定酸度和(he)銻離子(zi)存(cun)在(zai)的情(qing)況下，磷酸根(gen)與(yu)鉬酸銨形成銻磷鉬(mu)混合(he)雜(za)多(duo)酸，它在(zai)常溫下可(ke)迅(xun)速(su)被抗壞血酸還(hai)原(yuan)為(wei)鉬藍，在(zai)700nm波長下測定。
實驗儀(yi)器(qi)
離心管(guan)（10ml、25ml）、坩(gan)堝、燒杯、容量瓶、移液槍(qiang)、分(fen)析天(tian)秤(cheng)、pH計(ji)、振蕩器(qi)、烘箱(xiang)、高速(su)離心機(ji)、紫外(wai)分(fen)光光度計(ji)、高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)鍋、馬弗(fu)爐
所需(xu)溶(rong)液
實(shi)驗步(bu)驟(zhou)
使用桿持(chi)式淺(qian)水(shui)型柱(zhu)狀(zhuang)底泥(ni)采樣(yang)器(qi)采取(qu)湖泊(bo)表層濕(shi)泥回實(shi)驗室(shi)進(jin)行(xing)磷形(xing)態(tai)分(fen)析。
1、將(jiang)坩堝編(bian)號並稱(cheng)重記(ji)錄，取(qu)濕(shi)泥放(fang)入(ru)坩堝中，稱(cheng)量濕(shi)泥與(yu)坩堝的總(zong)重量，放入(ru)烘箱60℃烘(hong)幹(gan)，再次(ci)記(ji)錄其總重(zhong)量，得(de)出底泥(ni)含水(shui)率(lv)。
2、將(jiang)烘幹(gan)的泥(ni)研(yan)磨後過100目(mu)篩(shai)，裝(zhuang)入(ru)編(bian)號4號(hao)自(zi)封(feng)袋中。
3、取(qu)50ml離心管(guan)並編(bian)號，取(qu)過(guo)篩(shai)後樣(yang)品各(ge)0.4g放(fang)入(ru)離心管(guan)中(zhong)，加(jia)入(ru)20ml 1 mol/L NH4Cl溶(rong)液（溶(rong)液1），放(fang)入(ru)搖床振蕩2h，用高速(su)離心機(ji)3800r離心15min，取(qu)上(shang)清液過(guo)濾(lv)後測得(de)弱(ruo)結(jie)合(he)態(tai)磷（LP），不(bu)用稀釋(shi)；（每步(bu)過(guo)後的提(ti)取(qu)液需要(yao)調(tiao)節ph在(zai)6-8的範(fan)圍，ph過低，值會偏低甚(shen)至(zhi)測不(bu)出(chu)來，ph高值會偏太大(da)。）
4、在(zai)離心管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru)20mL純(chun)水(shui)，振蕩30min後3900r離心15min去除上清液，再加(jia)入(ru)20ml Na2S2O4-NaHCO3混合(he)溶(rong)液（溶(rong)液2），振蕩30min，3900r離心15min取(qu)上(shang)清液過(guo)濾(lv)，測(ce)鐵結(jie)合(he)態磷（Fe-P），稀釋(shi)倍(bei)數(shu)5~10倍；（溶(rong)液有臭(chou)雞蛋味，為(wei)反應(ying)正(zheng)常，沒(mei)有則要(yao)註(zhu)意。沈澱過夜後，若上(shang)層有白(bai)色或(huo)者(zhe)黃(huang)色懸(xuan)浮(fu)物(wu)，需(xu)過(guo)濾(lv)完(wan)了在(zai)進(jin)行(xing)測定。）
5、在(zai)離心管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru)20mL純(chun)水(shui)，振蕩30min後8000r離心5min去除上清液，再加(jia)入(ru)0.1 mol/L NaOH溶(rong)液（溶(rong)液3）20ml，振蕩16h後3900r離心15min，取(qu)上(shang)清液過(guo)濾(lv)，稀釋(shi)倍(bei)數(shu)0~5倍，直(zhi)接(jie)測(ce)鋁(lv)結合態(tai)磷（Al-P）；取(qu)50ml比(bi)色管(guan)並貼標簽(qian)編(bian)號，取(qu)上(shang)清液（稀釋(shi)倍(bei)數(shu)要(yao)和(he)鋁(lv)結合態(tai)磷要(yao)壹(yi)致(zhi)），用純(chun)水(shui)稀釋(shi)至(zhi)25ml標線處(chu)，加入(ru)25ml氧(yang)化(hua)劑(ji)（溶(rong)液4）放(fang)入(ru)高壓滅(mie)菌(jun)鍋，120℃下滅(mie)菌(jun)30min後，測得(de)總磷（TP）；有機(ji)磷（OP）含量是TP與(yu)Al-P差值，總磷的(de)稀釋(shi)倍(bei)數(shu)要(yao)根(gen)據(ju)總體(ti)積(ji)50mL來(lai)反推所用的樣(yang)品
震蕩(dang)
6、在(zai)離心管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru)20mL純(chun)水(shui)，振蕩30min後3900r離心15min去除上清液，再加(jia)入(ru)0.5 mol/L HCl溶(rong)液（溶(rong)液5）20ml，振蕩16h後3900r離心15min，取(qu)上(shang)清液過(guo)濾(lv)，上(shang)清液稀釋(shi)5~10倍(bei)後，直(zhi)接(jie)測(ce)鈣結(jie)合(he)態(tai)磷（Ca-P）；
7、在(zai)離心管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru)20mL去離子(zi)水(shui)，振蕩30min後3900r離心15min去除上清液，放(fang)入(ru)烘箱70℃烘(hong)幹(gan)至(zhi)脫離離心管(guan)壁(bi)（至(zhi)少壹(yi)天(tian)壹(yi)夜(ye)），全(quan)部倒(dao)入(ru)編(bian)好號(hao)的(de)坩堝中放(fang)入(ru)馬弗爐（坩堝的標簽(qian)用橡(xiang)皮擦掉，用鉛(qian)筆(bi)寫），550℃燒結2h（馬弗(fu)爐有壹定的升溫時(shi)間，3h後手動關(guan)掉，開門(men)降(jiang)溫2h以上(shang)取(qu)出(chu)，避(bi)免燙(tang)傷）；樣(yang)品再次(ci)放回離心管(guan)中(zhong)，如(ru)果(guo)燒過的樣(yang)品有結塊(kuai)，用藥匙搗(dao)碎(sui)，加(jia)入(ru)1 mol/L HCl溶(rong)液（溶(rong)液6）20ml，振蕩16h後3900r離心15min，取(qu)上(shang)清液過(guo)濾(lv)，比(bi)色時(shi)加入(ru)同體(ti)積(ji)1mol/L NaOH至(zhi)pH=7（同體(ti)積(ji)是(shi)與(yu)加入(ru)的不(bu)稀釋(shi)的(de)樣(yang)品同體(ti)積(ji)），測(ce)得(de)殘渣態磷（Res-P），稀釋(shi)5~10倍(bei)。
8、將(jiang)上述所有需要(yao)比(bi)色的(de)溶(rong)液取(qu)3ml，加入(ru)0.3ml鉬銻抗顯色劑（溶(rong)液7）振蕩均(jun)勻，顯(xian)色40min後在(zai)紫外(wai)分(fen)光光度計(ji)比(bi)色；
註(zhu)：紫外(wai)分(fen)光光度計(ji)比(bi)色過(guo)程(cheng)：打(da)開UV.2.52軟(ruan)件，再打(da)開紫外(wai)分(fen)光光度計(ji)，進(jin)行(xing)連(lian)接(jie)儀(yi)器(qi)，打(da)開總(zong)磷或(huo)者(zhe)磷酸根(gen)標曲(qu)，將(jiang)兩個比(bi)色皿洗凈(jing)加(jia)入(ru)去離子(zi)水(shui)放(fang)入(ru)比(bi)色槽，進(jin)行(xing)自動(dong)較零後，開始(shi)樣(yang)品比(bi)色。
測(ce)樣(yang)
數據(ju)處(chu)理
將(jiang)測得(de)數據(ju)導(dao)入(ru)EXCEL中，定量計(ji)算(suan)出各(ge)形態(tai)磷含量並整(zheng)理出(chu)具(ju)報(bao)告(gao)。
數(shu)據(ju)導(dao)入(ru)
計(ji)算(suan)公式(shi)如下：
式中(zhong)：
w-土壤中總(zong)磷的(de)含量；A-試(shi)料的吸(xi)光度值；A0-空白(bai)試(shi)驗的吸光度值；a-校準(zhun)曲線的截(jie)距(ju)；V1-試(shi)樣(yang)定容體(ti)積(ji)；b-校準(zhun)曲線的斜(xie)率；m-試(shi)樣(yang)量；V2-試(shi)料體(ti)積(ji)；Wdm-土壤幹(gan)物質(zhi)的(de)量。
智(zhi)感(gan)服(fu)務
智(zhi)感(gan)擁有壹系列完(wan)善的(de)服(fu)務體(ti)系，包括(kuo)項目(mu)方(fang)案(an)設計(ji)、環境(jing)樣(yang)品采樣(yang)、實驗室(shi)模擬實(shi)驗、環境(jing)樣(yang)品檢(jian)測(ce)、實驗數據(ju)分(fen)析以(yi)及技(ji)術(shu)指導(dao)等服(fu)務。智(zhi)感(gan)始終(zhong)堅持(chi)以客戶(hu)需求(qiu)為(wei)導(dao)向，以(yi)專業技術(shu)和(he)優(you)質(zhi)服(fu)務為(wei)支撐，為(wei)客戶(hu)提供(gong)高(gao)效、精準(zhun)的技(ji)術(shu)解(jie)決(jue)方(fang)案(an)。歡迎(ying)有意向(xiang)的(de)客戶(hu)與(yu)智(zhi)感(gan)取得(de)聯(lian)系~
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